바이오인

백신 기술 평가를 위한 Gaussia luciferase mRNA 생산

1. 계약명: 백신 기술 평가를 위한 Gaussia luciferase mRNA 생산

2. 계약 기간 : 계약체결일 ~ 12.10.

3. 사업수행체계 :

4. 사업내용

가. 목적 및 필요성:

○ 코로나바이러스감염증(COVID)-19(이하 코로나19)는 ‘19년 12월 발생하여 지속적으로 유전자 변이로 인한 다양한 유전형이 보고되고 있으며, 기 개발된 백신의 효능에 영향을 미칠 뿐 아니라 장기간에 걸쳐 새로운 변종 바이러스 출현의 가능성이 제시되고 있기 때문에 적절한 대응이 요구되고 있음

○ mRNA백신은 현존하는 백신 기술 중 가장 빠르게 개발이 가능하며, 안전성과 효율성 및 대량생산에 있어 장점을 보유하고 있어 코로나19감염증 및 새롭게 등장하는 바이러스에 대응하기 위한 백신으로 각광 받고 있음

○ 국립보건연구원은 신기술기반 백신플랫폼 개발지원 사업 등 mRNA 기술요소 개발 및 mRNA백신 플랫폼 확립에 필요한 기초 기술을 확보하기 위한 과제를 수행중이며 기술요소 개발 및 평가를 위해 필요한 리포터 발현 mRNA 물질 제작이 요구되는 상황임

○ 따라서 mRNA백신 기술요소 개발 및 평가를 위해 LNP 등 전달체의 in vivo 항원 전달 효율을 정량적으로 평가할 수 있는 Gaussia luciferase mRNA 물질 대량생산을 수행하고자함

나. 과업 내용

○ Gaussia luciferase mRNA 합성 및 정제

- 원형 IVT 벡터로부터 Foward primer와 Poly (A) tail을 포함하는 Reverse primer를 사용하여 PCR 반응으로 선형화된 DNA template를 제작

- agarose gel 전기영동을 이용하여 DNA template 길이를 확인후, 정제 및 농도 측정

- 선형화된 PCR-amplified DNA template와 RNA중합효소, RNA 단위체(NTP), 유리딘 유도체 (m1Ψ), Clean cap 등을 혼합하여 IVT system으로 transcription 수행

- DNase 처리하여 DNA template를 제거 후, commercial purification kit를 사용하여 정제 또는 large-scale의 경우, high performance LC (HPLC)을 사용하여 정제 및 농도 측정

○ 세포주에서 mRNA-LNP 발현 확인

- HeLa 세포주에 transfection 한 후, Luciferase assay를 수행하여 발현 확인

○ 결과보고서 작성 및 물질제공

- mRNA 합성 결과보고서 작성

- 정제된 mRNA 1mg 및 DNA plasmid 제공

다. 추진 체계

○ 발주부서(감염병백신연구과)

- Gaussia luciferase mRNA 합성 요청

- 각 단계별 방법 절차 확인, 진행상황 점검, 최종 결과물 확인

○ 과업수행기관

- 발주부서에서 요청한 1mg Gaussia luciferase mRNA 합성

- 실험 조건이 변경될 경우, 발주부서와 사전 협의 후 진행

라. 과제수행 시 요구사항

○ 최종 1mg Gaussia luciferase mRNA 제작

○ 최종 결과보고서에는 발주부서가 요청하는 결과물 및 각 단계별 방법을 자세히 작성하며, 최종 결과보고서 제출 시 원본데이터는 전자파일로 별도 제출

5. 사업관리

가. 추진일정

나. 결과물 등 제출

○ Gaussia luciferase mRNA(1 mg) 및 DNA plasmid 제공

○ 각 단계별 실험 방법과 결과물 분석 및 평가 결과 자료가 포함된 최종보고서(전자파일) 제출

6. 참가자격

○ 계약방법: 총액입찰

○ 참가자격: 국가종합전자조달시스템 입찰참가자격등록규정」에 따라 입찰(개찰)일 전일까지 나라장터에 학술연구용역[업종코드 1169]으로 입찰참가 등록한 자

※ 제시된 과업을 단독으로 수행이 가능한 사업자 (공동수급 및 하도급 불가)

※「중소기업기본법」제2조에 따른 소기업자 및「소상공인 보호 및 지원에 관한 법률」제2조에 따른 소상공인으로서「중소기업 범위 및 확인에 관한 규정」에 따라 발급된 <소기업·소상공인 확인서>를 소지한 자

※ 비영리법인 참여 가능

※ 하도급 및 공동수급 불가

...................(계속)

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