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제도동향

[식품] 건강기능식품공전 시험법 해설서

  • 등록일2023-11-21
  • 조회수2624
  • 분류제도동향 > 그린바이오 > 식품기술

 

 

[식품] 건강기능식품공전 시험법 해설서

 

◈ 목차

01. 비타민류

02. 무기질류

03. 단백질 및 아미노산류

04. 탄수화물 및 당류

05. 지방산 및 지질류

06. 테르펜류

07. 페놀류

08. 기타

 

 

◈본문

비타민류


1. 비타민 A

● 제조기준

(1) 원료

  • 가.레티닐팔미트산염(Retinyl Palmitate)

  • 나.레티닐 아세트산염(Retinyl Acetate)

  • ※︎「식품첨가물의 기준 및 규격에 등재되어 있는 분말비타민 A(Dry Formed Vitamin A) 또는 유성비타민 A 지방산 에스테르(Vitamin A in Oil)의 형태로 사용

  • 다.식품원료를 사용하여 비타민 A를 보충할 수 있도록 제조·가공한 것

(2) 비타민 A 보충의 목적으로 비타민 A 원료와 베타카로틴 원료를 혼합하여 사용할 수 있음. 이 때 최소함량기준은 비타민 A와 베타카로틴의 합으로 적용하며, 최대함량기준은 각각 별도로 적용함

(3) 베타카로틴의 비타민 A 전환계수는 1/2을 적용함. 단, 식품원료를 분말화 하거나 물 또는 주정으로 단순히 추출하여 베타카로틴을 보충할 수 있도록 제조·가공한 것의 경우 1/6을 적용함


● 시험방법

항목

제1법

제2법

시험과정 요약

수산화칼륨 용액, 피로갈롤 에탄올

용액으로 비누화한 후 벤젠으로 추출하고

클로로포름에 용해한 뒤 정색용액과 반응

수산화칼륨 용액, 피로갈롤에탄올 용액으로

비누화한 후 석유에테르로 추출하고

이소프로판올에 용해

분석조건

분광광도계

(UV-Vis Spectrophotometer)

고속액체크로마토그래프-형광검출기

(HPLC-FLD)


1-1. 비타민 A(제1법)


1. 시험 원리

<시험방법의 요약>

본 시험법은 시료를 수산화칼륨 용액과 피로갈롤에탄올 용액으로 비누화한 후 가수분해된 비타민 A를 벤젠으로 추출하고, 클로로포름에 재용해한 뒤 비타민 A와 정색용액(삼염화안티몬 클로로포름 용액)을 반응시켜 분광광도계를 이용하여 정량 분석하는 방법

▶︎ 비누화 반응은 에스터화의 역반응으로 알칼리에 의한 에스테르의 가수분해를 의미한다. 검체에 알칼리 환원제(KOH)를 첨가했을 때 에스터 결합이 분해되어 비타민 A(지용성)와 에스터 결합되어 있는 지방산을 비누화시켜 수용성의 지방산 염(비누, soap)으로 전환시킨다. 이때 수용성의 지방산 염은 물에 녹여 분리 제거하고, 가수분해된 지용성의 레티놀은 유기용매로 추출한다. 비누화 반응은 레티닐 에스터(retinyl palmitate, retinyl acetate) 레티놀로 가수분해하여 검체 중 비타민 A(레티놀 함량을 분석할 수 있도록 한다.

레티닐 에스티의 비누화 반응에 의한 가수분해

레티닐 에스티의 비누화 반응에 의한 가수분해


▶︎ 해당 시험법(Carr-Price Method)은 1926년 Carr과 Price로부터 개발되었다. 삼염화안티몬(antimonous trichloride, SbCl3)의 클로로포름 포화용액은 비타민 A와 반응하여 620 nm에서 최대흡수파장을 나타내는 청색을 띤다. 이 반응을 Carr-Price 반응이라 하며, 발색이 불안정하다는 단점이 있으나 비타민 A의 비교적 특이한 반응으로 감도가 높다. 그러나 시료액에 소량의 수분이 존재할 때는 정량이 저해되므로 탈수시키는데 특히 주의해야 한다.

비타민 A 정색반응

비타민 A 정색반응


2. 표준물질

레티닐 팔미드산염(Retinyl palmitate)

분석 물질명(Name)

레티닐 팔미드산염(Retinyl palmitate)

CAS number

79-81-2

분자식(Molecular Formula)

C36H60O2

분자량(Molecular Weight)

524.86

녹는점(Melting Point)

26oC


레티닐 아세트산염(Retinyl Acetate)

분석 물질명(Name)

레티닐 아세트산염(Retinyl Acetate)

CAS number

127-47-9

분자식(Molecular Formula)

C22H32O2

분자량(Molecular Weight)

328.49

녹는점(Melting Point)

57~58oC



...................(계속)

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